卵母细胞皮质颗粒(corticalgranules)花生凝集素荧光标记(PNA-FITC)染色试剂盒
- 简介:厂家直销卵母细胞皮质颗粒(corticalgranules)花生凝集素荧光标记(PNA-FITC)染色试剂盒,卵母细胞皮质颗粒(corticalgranules)花生凝集素荧光标记(PNA-FITC)染色试剂盒采用的技术是经过精心研制、成功实验证明的权威而经典的技术方法,收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。...
产品详细
主要用途
卵母细胞皮质颗粒(cortical granules)花生凝集素荧光标记(PNA-FITC)染色试剂是一种旨在使用荧光素标记的花生凝集素荧光染色技术,分析卵母细胞皮质颗粒分布和密度状况的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种动物或人体卵母细胞包括冻存或衰老卵母细胞,以及体内/体外受精、体内/体外成熟或活化卵母细胞等皮质颗粒分布和密度检测。产品严格无菌,即到即用,操作简便,性能稳定,荧光清晰。
技术背景
卵母细胞皮质颗粒(cortical granules;CG)是一种膜结合型分泌性球状或椭圆状囊泡细胞器,起源于卵泡生长期的高尔基体。卵母细胞未成熟时,分布在胞浆内。当卵母细胞生长和成熟时,迁徙到皮质,形成周边卵黄膜下连续一层结构。在卵母细胞皮质层,皮质颗粒实行胞外分泌(exocutosis)等皮质反应(cortexreaction),应对卵母细胞授精或活化引起的胞浆钙离子水平增高。其内容物释放进卵周隙(perivitellinespace),改变透明带(zona pellucida),阻止多精入卵(polyspermy)。使用荧光素标记的花生凝集素(Isothiocyano-fluoresceinated peanut Arachis hypogaea agglutinin;PNA-FITC)荧光染色技术,是卵母细胞皮质反应分析的最常用的方法,包括卵母细胞减数分裂成熟阶段、授精、活化等,皮质颗粒的分布和密度变化。 通过常用的荧光显微镜(激发波长480nm,散发波长530nm)便可清晰观察到绿色荧光皮质颗粒。
产品内容
处理液(Reagent A) 2 X 2 毫升
清理液(Reagent B) 100 毫升
固着液(Reagent C) 10 毫升
封阻液(Reagent D) 30 毫升
通透液(Reagent E) 10 毫升
染色液(Reagent F) 2 毫升
复染液(Reagent G) 2 毫升
产品说明书 1 份
保存方式
保存在-20℃冰箱里;染色液(Reagent F)和复染液(Reagent G)避免光照,有效保证 6 月。
用户自备
1.5 毫升离心管:用于样品操作的容器
载玻片和盖玻片:用于样品操作
(共聚焦)荧光显微镜:用于观察染色的细胞
实验步骤2
1. 移取新鲜获得的卵母细胞到 1.5 毫升离心管
2. 加入 200 微升处理液(Reagent A),混匀
3. 置于 37℃培养箱里孵育 4 分钟
4. 小心抽去处理液
5. 加入 500 微升清理液(Reagent B),混匀
6. 小心抽去清理液
7. 重复实验步骤 5 至 6 一次
8. 加入 500 微升固着液(Reagent C),混匀
9. 室温下孵育 30 分钟
10.小心抽去固着液
11.加入 500 微升封阻液(Reagent D),混匀
12.室温下孵育 10 分钟
13.小心抽去封阻液
14.重复实验步骤 11 至 13 二次
15.加入 500 微升通透液(Reagent E),混匀
16.室温下孵育 5 分钟
17.小心抽去通透液
18.加入 500 微升清理液(Reagent B),混匀
19.小心抽去清理液
20.重复实验步骤 18 至 19 一次
21.加入 100 微升染色液(Reagent F),混匀
22.室温下孵育 30 分钟,避免光照
23.小心抽去染色液
24.加入 100 微升复染液(Reagent G),混匀
25.室温下孵育 10 分钟,避免光照
26.小心抽去复染液
27.加入 500 微升清理液(Reagent B),混匀
28.小心抽去上清液
29.重复实验步骤 27 至 28 一次
30.加入 100 微升清理液(Reagent B),混匀
31.即刻移取 50 至 100 微升到洁净的载玻片上(注意:如果荧光强度偏弱,建议使用抗淬灭剂)
32.盖上盖玻片
33.即刻在(共聚焦)荧光显微镜下观察
观察绿色荧光—染色液(Reagent F):滤波器激发波长 480nm,散发波长 530nm ――可见绿色荧光,表明皮质颗粒
观察红色荧光—复染液(Reagent G):滤波器激发波长 514nm,散发波长 603nm ――可见红色荧光,表明核染色体
34.参考结果
注意事项
1. 本产品为 20 次操作
2. 操作时须戴手套
3. 染色完成后,即刻进行检测分析
4. 皮质颗粒参考图像如下:
5. 本公司提供系列发育生物学相关检测试剂产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定荧光清晰
使用承诺
用户收到货后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
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卵母细胞皮质颗粒(cortical granules)花生凝集素荧光标记(PNA-FITC)染色试剂盒说明书
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更新时间:2020-12-15 12:00:54 作者:云之羽生物 点击:678次
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