冰冻切片纤维蛋白(fibrin)菲舍尔-伦德朗(Fraser-Lendrum)染色试剂盒

主要用途

冰冻切片纤维蛋白（fibrin）菲舍尔-伦德朗（Fraser-Lendrum）染色试剂是一种旨在使用三色染料（trichrome），分析和区分冰冻组织切片中的纤维蛋白的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良菲舍尔-伦德朗（Fraser-Lendrum）方法、成功实验证明的。广泛用于心血管系统的研究等。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。

技术背景

纤维蛋白（fibrin），又称为活化凝血因子 I（Factor Ia），是一种嗜酸性（acidophil）不溶性非球蛋白，来自于血浆中的纤维蛋白原（fibrinogen），经过凝血酶的水解后聚合而成。其主要功能包括信号传导、血液凝结、血小板活化，以达到终止出血，即组织损伤引起血管和血小板开始反应，使纤维蛋白原转化为纤维蛋白，形成网架，产生血凝块而止血。纤维蛋白异常增多会导致血栓（thrombosis），而产生不足，引起出血，例如纤维蛋白原血症（dysfibrinogenaemia）。菲舍尔-伦德朗（Fraser-Lendrum）染色技术是众多纤维蛋白染色技术中最为著名的，其开发了多种染色变化方法，其特点是使用乙醇化饱和苦味酸，主要用于区分纤维蛋白、胶原蛋白和红细胞。

产品内容

清理液（Reagent A）    200 毫升

固着液（Reagent B）    100 毫升

净化液 A（Reagent C）   10 毫升

净化液 B（Reagent D）   10 毫升

媒染液（Reagent E）     10 毫升

梅氏液（Reagent F）     10 毫升

桔染液（Reagent G）     10 毫升

品红液（Reagent H）     10 毫升

修正液（Reagent I）     10 毫升

酸性液（Reagent J）     10 毫升

染色液（Reagent K）     10 毫升

产品说明书           1 份

保存方式

保存在 4℃冰箱里，避免光照；试剂具有腐蚀性，注意安全；有效保证 3 月。

用户自备

无离子水：用于清洗样品

培养箱：用于样品反应孵育

中性树脂：用于切片封片光学显微镜：用于切片染色后观察分析

实验步骤

1． 取出 10 片待测的 5 微米厚的冰冻组织切片

2． 小心加上 200 微升清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面

3． 室温下孵育 5 分钟

4． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

1． 小心将切片置入 50 毫升固着液（Reagent B）中

2． 放入 60℃培养箱孵育 1 小时

3． 取出切片，小心移去固着液（Reagent B）

4． 室温下，小心将切片置入 50 毫升清理液（Reagent A）中孵育 2 分钟

5． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

6． 小心加上 200 微升净化液 A（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面

7． 室温下箱孵育 15 分钟

8． 小心移去净化液 A（Reagent C）

9． 使用用户自备的无离子水清洗 10 分钟

10．小心加上 200 微升净化液 B（Reagent D）在切片上，铺满整个切片样品表面

11．室温下箱孵育 3 分钟

12．小心移去净化液 B（Reagent D）

13．使用用户自备的无离子水清洗 2 分钟

14．小心加上 200 微升媒染液（Reagent E）在切片上，铺满整个切片样品表面

15．室温下箱孵育 5 分钟

16．小心移去媒染液（Reagent E）

17．室温下，小心将切片置入 50 毫升清理液（Reagent A）中孵育 2 分钟

18．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

19．小心加上 200 微升梅氏液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面

20．室温下孵育 5 分钟

21．小心移去梅氏液（Reagent F）

22．使用用户自备的无离子水清洗 5 分钟

23．小心加上 200 微升桔染液（Reagent G）在切片上，铺满整个切片样品表面

24．室温下孵育 5 分钟

25．小心移去桔染液（Reagent G）

26．小心加上 200 微升清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面

27．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

28．小心加上 200 微升品红液（Reagent H）在切片上，铺满整个切片样品表面

29．室温下孵育 5 分钟

30．小心移去品红液（Reagent H）

31．室温下，小心将切片置入 50 毫升清理液（Reagent A）中孵育 2 分钟

32．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

33．小心加上 200 微升修正液（Reagent I）在切片上，铺满整个切片样品表面

34．室温下孵育 15 秒钟

35．小心移去修正液（Reagent I）

36．室温下，小心将切片置入 50 毫升清理液（Reagent A）中孵育 2 分钟

237．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

38．小心加上 200 微升酸性液（Reagent J）在切片上，铺满整个切片样品表面

39．室温下孵育 5 分钟

40．小心移去切片上的酸性液（Reagent J）

41．室温下，小心将切片置入 50 毫升清理液（Reagent A）中孵育 2 分钟

42．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

43．小心加上 200 微升 染色液（Reagent K）在切片上，铺满整个切片样品表面

44．室温下孵育 1 分钟，或直至胶原纤维显示绿色（注意：可以镜下观察）

45．小心移去切片上的染色液（Reagent K）

46．室温下，小心将切片置入 50 毫升清理液（Reagent A）中孵育 2 分钟

47．小心移去切片上的清理液（Reagent A）

48．（选择步骤）常规透明处理

49．放上盖玻片或封片（中性树脂）

50．即刻在一般光学显微镜下观察：

细胞核――呈现蓝黑色

纤维蛋白、角蛋白（keratin）、胞浆颗粒――呈现红色

红细胞――呈现橘黄色

胶原纤维――呈现绿色

注意事项

1． 本产品为 50 次操作

2． 操作时，须戴手套

3． 试剂具有腐蚀性，注意操作安全

4． 建议使用玻璃染色缸

5． 每次更换试剂溶液时，保持切片面基本晾干

6． 试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面

7． 整个操作，在避光状态下进行

8． 染色完成后，即刻进行光学显微镜观察

9． 样品染色后保存，避免光照

10．本公司提供系列纤维蛋白染色试剂产品

质量标准

1． 本产品经鉴定性能稳定

2． 本产品经鉴定显色清晰

使用承诺

用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

说明书下载

如需要【冰冻切片纤维蛋白(fibrin)菲舍尔-伦德朗(Fraser-Lendrum)染色试剂盒】电子版说明书及相关资料，请联系客服索取！

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更新时间：2020-12-15 12:00:54    作者：羽哚生物     点击：734次