冰冻切片总游离胆固醇菲律宾(FILIPIN)荧光染色试剂盒

主要用途

冰冻切片总游离胆固醇菲律宾（FILIPIN）荧光染色试剂是一种旨在通过荧光染料菲律宾（FILIPIN）特异性与胆固醇结合，形成复合体，并产生蓝色荧光现象的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。主要适用于冰冻切片组织游离胆固醇分布的检测。广泛用于组织病理生理的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，荧光清晰。

技术背景

胆固醇（cholesterol）是一类称之为固醇类（sterols）或聚类异戊二烯（polyisoprenoid）或三萜皂甙元（triterpene）的多环化合物（polycyclic compound）。其分子式为 cholest-5-en-3β-ol。胆固醇以游离（free form）和脂化结合（ester）两种形式广泛存在于所有动物组织中，主要以非脂化形式存在于细胞膜中。在膜功能和脂代谢以及激素合成中起着重要作用。菲律宾（FILIPIN）是一类由四种同分异构体的多烯抗生素（polyeneantibiotics）或多马霉素（polyene macrolide）的总称。源自于 S. FILIPINENSIS 细菌的培养液中。其分子式为 C35H58O11，分子量为 654.8。菲律宾与胆固醇结合形成聚集体或复合物。

产品内容

清理液（Reagent A）    100 毫升

固着液（Reagent B）    10 毫升

抗干扰液（Reagent C）    10 毫升

染色液（Reagent D）    5 毫升

产品说明书          1 份

保存方式

保存染色液（Reagent D）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在 4℃冰箱里；有效保证 6 月。

用户自备

荧光显微镜：用于样品染色后观察分析

实验步骤

一、 样本固着处理

1． 取出待测的 5 至 10 微米厚的冰冻切片（注意：使用快速冷冻处理－snap frozen 的冰冻切片，不宜使用包埋处理）

2． 小心加上 200 微升清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个样品表面

3． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

4． 重复实验步骤 2 至 3 二次5． 小心加上 200 微升固着液（Reagent B），铺满整个样品表面

6． 室温下孵育 30 分钟

7． 小心移去切片上的固着液（Reagent B）

8． 小心加上 200 微升清理液（Reagent A），清洗样品表面

9． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

10．重复实验步骤 8 至 9 二次

二、样本染色处理

1． 小心加上 200 微升抗干扰液（Reagent C），铺满整个切片样品表面

2． 室温下孵育 10 分钟

3． 小心移去切片上的抗干扰液（Reagent C）

4． 小心加上 100 微升染色液（Reagent D），铺满整个切片样品表面

5． 室温下孵育 30 分钟，避免光照

6． 小心移去切片上的染色液（Reagent D）

7． 小心加上 200 微升清理液（Reagent A），清洗样品表面

8． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）

9． 重复实验步骤 7 至 8 二次

10．即刻放上盖玻片或封片

11．在荧光显微镜下观察：激发波长：340nm；散发波长：430nm――胆固醇阳性呈现蓝色荧光

注意事项

1． 本产品为 50 次操作

2． 操作时，须戴手套

3． 操作时，避免污染母液

4． 试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面

5． 样品染色完成后，即刻进行荧光显微镜观察

6． 荧光容易受到光漂白（photobleach），建议使用抗淬灭剂Ⅰ－12058.2

7． 本产品染色后，可用于电镜分析

8． 本公司提供系列组织细胞生物化学成分染色试剂产品

质量标准

1． 本产品经鉴定性能稳定

2． 本产品经鉴定荧光清晰

使用承诺

用户收到货后，应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定，保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题，请立即以书面形式（实验报告）与本公司联系，并将该产品退回，经检验确系产品质量所致，本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致，本公司不承担由此造成的损失。

说明书下载

如需要【冰冻切片总游离胆固醇菲律宾(FILIPIN)荧光染色试剂盒】电子版说明书及相关资料，请联系客服索取！

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更新时间：2020-12-15 12:00:45    作者：云羽生物     点击：917次