伏马毒素（烟曲霉毒素B）ELISA检测试剂盒

一、检测原理

本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被伏马毒素抗原，样本中的伏马毒素和微孔条上预包被的抗原竞争抗伏马毒素抗体，同时抗伏马毒素抗体与酶标二抗（酶标物）相结合，经TMB底物显色，样本吸光度值与其所含伏马毒素量呈负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，与标准曲线比较即可得出样品中伏马毒素（FB）的含量。

二、检测范围

本试剂盒是应用ELISA技术研发的药物残留检测产品,与仪器分析技术比较，能经济、快速地检测出小麦、玉米、饲料等样品中伏马毒素（FB）的含量。

三、试剂盒组成

酶标板1块，96孔/板
标准液6瓶（1.0 mL/瓶）：
0 ppb，2ppb，5ppb，20ppb，40ppb，100ppb
酶标记物…………………………………7mL
抗体工作液 ………………………………7mL
底物液A……………………………………7mL
底物液B……………………………………7mL
终止液…………………………………………7mL
10×浓缩洗涤液……………………………50mL
说明书………………..………………1份

四、使用单位需自备的设备及试剂

（1）仪器
微孔板酶标仪(450 nm/630 nm)
振荡器
离心机
涡旋仪
粉碎机
电子天平（感量0.01 g）
（2）器材
单道微量移液器：20 μL～200 μL，100 μL~1000 μL
多道微量移液器：30 μL～300 μL
（3）试剂
甲醇、氯化钠、去离子水

五、酶联免疫检测步骤

测定前须知：

1、 使用之前将所有试剂和需用微孔板回升至室温。
2、 使用之后立即将所有试剂放回2~8 ℃。
3、 在使用中不要让微孔干燥。
4、 在ELISA分析中的重复性，很大程度上取决于洗板的一致性，正确的洗板操作是ELISA测定程序中的要点。
5、 在所有恒温孵育过程中，避免光线照射，用盖板膜盖住微孔板。

测定步骤：

1、 将所需试剂和微孔板从冷藏环境中取出，在室温下平衡30 min，每种液体使用前均须摇匀。注意标准液均需做2个平行试验。
2、 加样：（切勿颠倒试剂加入顺序）加酶标物50 mL到对应的微孔中，再加入标准品/样本50 mL/孔，最后加入抗体工作液50 mL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温25 ℃避光反应30min。
3、 洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，加洗涤液 250 μL/孔，每次浸泡15~30 s，充分洗涤4~5次，用吸水纸拍干。
4、 显色：加入底物液A 50 mL/孔，再加入底物液B 50 mL/孔轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光反应15 min。
5、 测定：每孔各加50 μL终止液，设定酶标仪在450 nm处，测定OD值（建议用450/630 nm双波长检测，在5 min内读完数据）。

六、试剂盒灵敏度、准确度、精密度

试剂盒灵敏度：2ppb
样本最低检测限：玉米、小麦等粮食作物及饲料………………200ppb
回收率：?? 玉米、小麦等粮食作物及饲料……………85±15%
精密度：试剂盒的变异系数均小于10%

七、贮藏条件及保存期

贮藏条件：在2~8 ℃保存试剂盒。
保存期：本试剂盒有效期为12个月。

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更新时间：2021-04-21 03:36:00    作者：云之羽生物     点击：465次